ข้อมูล

การบรรจบกันหรือการบรรจบกัน คำใดถูกต้องในการอธิบายพื้นที่ % ที่ครอบคลุมโดยเซลล์

การบรรจบกันหรือการบรรจบกัน คำใดถูกต้องในการอธิบายพื้นที่ % ที่ครอบคลุมโดยเซลล์



We are searching data for your request:

Forums and discussions:
Manuals and reference books:
Data from registers:
Wait the end of the search in all databases.
Upon completion, a link will appear to access the found materials.

ฉันสังเกตว่าทั้งคู่ถูกใช้ในเอกสารทางวิทยาศาสตร์หลายฉบับ สองคำนี้ใช้แทนกันได้หรือเปล่า?


การค้นหาการบรรจบกันของเซลล์ใน Google Scholar จะส่งกลับ 239000 ครั้ง ขณะที่ค้นหาการบรรจบกันของเซลล์จะส่งกลับ 75,000 ครั้ง

ดูบริบทที่ใช้สนับสนุนความรู้สึกของฉันซึ่งก็คือ

1: "บรรจบกัน" ควรใช้ในบริบทของ "% confluence"

2: "บรรจบกัน" ควรใช้ในบริบทที่คุณอธิบายการบรรจบกันในระดับสูงหรือต่ำ


ฉันได้บันทึกประวัติและการใช้งานข้อกำหนดในปัจจุบัน บรรจบกัน และ บรรจบกัน ในการเพาะเลี้ยงเซลล์ในคำตอบสำหรับคำถามอื่นโดยเฉพาะเกี่ยวกับเทอม บรรจบกัน. เนื่องจากคำถามปัจจุบันไม่ได้ถูกทำเครื่องหมายว่าซ้ำกับคำถามนั้น และฉันเชื่อว่าคำตอบเดียวที่โพสต์ว่าไม่ถูกต้อง ฉันกำลังให้คำตอบสั้น ๆ ที่นี่และนำผู้อ่านไปยังคำตอบอื่นของฉันเพื่อเป็นหลักฐานสนับสนุนทั้งหมด

ถาม: การบรรจบกันและการบรรจบกันเป็นคำสองคำ [ต่างกัน] หรือสามารถใช้แทนกันได้?

NS. จุดบรรจบ และ บรรจบกันที่ใช้ในการเพาะเลี้ยงเซลล์มี ความหมายเหมือนกันทุกประการและการใช้งานเป็นเรื่องของความชอบส่วนบุคคลล้วนๆ

จุดบรรจบ เป็นคำภาษาอังกฤษมาตรฐานตั้งแต่ศตวรรษที่ 15 และใช้เป็นแนวคิดเชิงนามธรรมหรือประยุกต์ใช้กับปรากฏการณ์ต่างๆ ในสาขาต่างๆ บรรจบกัน เป็นคำที่ใช้เฉพาะในความสัมพันธ์กับการเพาะเลี้ยงเซลล์ ในแง่นี้ คำจำกัดความจากรายการ Wikipedia สั้น ๆ บน บรรจบกัน (sic) มีความเกี่ยวข้อง:

ในชีววิทยาการเพาะเลี้ยงเซลล์ บรรจบกัน (sic) หมายถึงเปอร์เซ็นต์ของพื้นผิวของจานเพาะเลี้ยงที่ปกคลุมด้วยเซลล์ยึดเกาะ ตัวอย่างเช่น การบรรจบกัน 50 เปอร์เซ็นต์หมายถึงการครอบคลุมพื้นผิวประมาณครึ่งหนึ่ง ในขณะที่การบรรจบกัน 100 เปอร์เซ็นต์หมายความว่าพื้นผิวถูกปกคลุมอย่างสมบูรณ์โดยเซลล์ และไม่มีที่ว่างเหลือสำหรับเซลล์ที่จะเติบโตเป็นชั้นเดียว

แม้ว่าจะไม่มีการรับประกันว่ารายการวิกิพีเดียนี้ถูกต้อง แต่ก็สะท้อนให้เห็นว่า (1) ตั้งแต่ปี 1960 ผู้เขียนบางคนใช้คำหนึ่งและผู้เขียนคนอื่นใช้คำอื่นเพื่อหมายถึงสิ่งเดียวกัน (2) ที่ผู้เขียนคนเดียวกันมี ใช้คำศัพท์ที่ต้องการโดยสัมพันธ์กับทั้งแนวคิด (โดยไม่มีคุณสมบัติเป็นตัวเลข) และตัวระบุเปอร์เซ็นต์

ฉันได้ตรวจสอบเอกสารล่าสุดใน Journal of Cell Science (อ้างอิงในหมายเหตุ (9) ของคำตอบอื่น ๆ ของฉันแล้ว และพบว่าการใช้ทั้งสองแบบข้างต้นยังคงเป็นปัจจุบัน เช่นเดียวกับการใช้งานแบบผสมของทั้งสองประเภทที่กำหนดโดย @MarchHo (การบรรจบกัน) แต่มาบรรจบกัน 50%) และตรงกันข้าม (บรรจบกัน แต่มาบรรจบกัน 50%)

วารสารทั้งหมดที่ฉันได้ดูและยอมรับข้อกำหนดทั้งสองข้อ และไม่พบการออกเสียงในหัวข้อนี้โดยองค์กรมาตรฐานหรือองค์กรวิชาชีพ

คำแนะนำ

ใช้อะไรก็ตามที่คนที่คุณใช้ทำงานด้วย หากคุณกำลังเริ่มต้นด้วยตัวเอง ให้เลือกขึ้นอยู่กับทัศนคติของคุณที่มีต่อภาษาอังกฤษหรือความเคารพที่คุณมีต่อผู้บุกเบิกการเพาะเลี้ยงเซลล์โดยเฉพาะ แต่ไม่ว่าคุณจะเลือกอะไร อย่าบอกคนอื่นว่าพวกเขา ควร ทำเหมือนเดิม.


ประเภทย่อยของเซลล์: 2 ประเภท (มีแผนภาพ)

วัฒนธรรมย่อย (หรือทางเดิน) หมายถึงการถ่ายโอนเซลล์จากภาชนะเพาะเลี้ยงหนึ่งไปยังภาชนะเพาะเลี้ยงอื่น วัฒนธรรมย่อยโดยปกติ (ไม่เสมอไป) เกี่ยวข้องกับการแบ่งย่อยของเซลล์ที่เพิ่มจำนวนที่ช่วยให้สามารถขยายพันธุ์ของสายเซลล์ได้

คำว่าหมายเลขข้อความใช้เพื่อระบุจำนวนครั้งที่วัฒนธรรมได้รับวัฒนธรรมย่อย

กราฟการเติบโตมาตรฐานของเซลล์ในวัฒนธรรมแสดงไว้ในรูปที่ 36.5 ระยะแล็กเริ่มต้นตามด้วยเฟสเอ็กซ์โปเนนเชียลหรือล็อก และเฟสที่ราบสูง ในช่วงระยะเวลาการเจริญเติบโตที่ใช้งานอยู่ในระยะบันทึก จะต้องเปลี่ยนสื่อบ่อยๆ มิฉะนั้นการเจริญเติบโตจะหยุดลง เนื่องจากความเข้มข้นของเซลล์เกินความสามารถของตัวกลาง วัฒนธรรมจึงต้องแบ่งออกเป็นวัฒนธรรมย่อย

วัฒนธรรมย่อยมีสองประเภท - วัฒนธรรมย่อย monolayer และวัฒนธรรมย่อยแบบแขวน

ประเภท # 1 วัฒนธรรม Monolayer:

เมื่อด้านล่างของภาชนะเพาะเลี้ยงถูกปกคลุมด้วยชั้นของเซลล์ที่ต่อเนื่องกัน โดยปกติจะมีความหนาเพียงเซลล์เดียว พวกมันจะถูกเรียกว่าการเพาะเลี้ยงแบบชั้นเดียว การเกาะติดกันของเซลล์ระหว่างกันและกับสารตั้งต้น (เช่น ภาชนะเพาะเลี้ยง) ถูกสื่อกลางผ่านไกลโคโปรตีนที่พื้นผิว (โมเลกุลการยึดเกาะของเซลล์) และแคลเซียมไอออน (Ca 2+ ) สำหรับการเพาะเลี้ยงย่อยของการเพาะเลี้ยงแบบชั้นเดียว มักจะจำเป็นต้องเอาตัวกลางออกและแยกเซลล์ออกจากชั้นชั้นเดียวโดยทำให้โมเลกุลการยึดเกาะของเซลล์เสื่อมโทรม นอกจากจะกำจัด Ca 2+ ออก

วิธีการแยกเซลล์:

มีวิธีการทางกายภาพและทางเอนไซม์สำหรับการแยกตัวของวัฒนธรรมชั้นเดียว (ตารางที่ 36.3)

การเขย่าทางกลและการขูดเซลล์ใช้สำหรับวัฒนธรรมที่ยึดติดอย่างหลวมๆ และต้องหลีกเลี่ยงการใช้โปรตีเอส ในบรรดาเอนไซม์ ทริปซินมักถูกใช้บ่อยที่สุด สำหรับโมโนเลเยอร์ของเซลล์บางชนิด ซึ่งทริปซินไม่สามารถแยกออกได้ จะใช้เอ็นไซม์อื่นๆ เช่น pronase, dispase และ collagenase ก่อนการแยกตัวของเซลล์ด้วยเอ็นไซม์ โมโนเลเยอร์มักจะต้องผ่านการปรับสภาพ EDTA ก่อนเพื่อกำจัด Ca 2+

เกณฑ์สำหรับวัฒนธรรมย่อยของ Monolayers:

การเพาะเลี้ยงย่อยควรดำเนินการอย่างเหมาะสมระหว่างช่วงกลางของระยะล็อกกับเวลาก่อนเข้าสู่ช่วงที่ราบสูง (รูปที่ 36.6) ไม่ควรเพาะเลี้ยงเซลล์ย่อยเมื่ออยู่ในระยะหน่วง มีการอธิบายเกณฑ์สำคัญอื่นๆ สำหรับวัฒนธรรมย่อยของโมโนเลเยอร์

ขอแนะนำให้วัฒนธรรมย่อยในวัฒนธรรมชั้นเดียวปกติหรือที่เปลี่ยนแปลงไปทันทีที่ถึงจุดบรรจบกัน การบรรจบกันหมายถึงระยะการเพาะเลี้ยงซึ่งใช้พื้นที่การเจริญเติบโตที่มีอยู่ทั้งหมดและเซลล์ต่างๆ จะติดต่อกันอย่างใกล้ชิด

ค่า pH ที่ลดลงมักจะมาพร้อมกับการเพิ่มความหนาแน่นของเซลล์เพาะเลี้ยง ดังนั้นเมื่อค่า pH ลดลง ตัวกลางจะต้องเปลี่ยนตามด้วยการเพาะเลี้ยงย่อย

กำหนดเวลาของวัฒนธรรมย่อย:

ขณะนี้สามารถกำหนดเวลากำหนดเวลาสำหรับวัฒนธรรมย่อยของแต่ละเซลล์ได้ สำหรับการเพาะเลี้ยงเซลล์ส่วนใหญ่ การเปลี่ยนแปลงของตัวกลางมักจะเกิดขึ้นหลังจาก 3-4 วัน และการเพาะเลี้ยงย่อยหลังจาก 7 วัน

วัตถุประสงค์ของวัฒนธรรมย่อย:

จุดประสงค์ที่ต้องการเซลล์เป็นเกณฑ์สำคัญอีกประการหนึ่งในการพิจารณาการเพาะเลี้ยงย่อย โดยทั่วไป ถ้าจะใช้เซลล์เพื่อวัตถุประสงค์เฉพาะ จะต้องทำการเพาะเลี้ยงย่อยบ่อยขึ้น

เทคนิคของวัฒนธรรมย่อย Monolayer:

วัฒนธรรมย่อยของเซลล์ชั้นเดียวโดยทั่วไปประกอบด้วยขั้นตอนต่อไปนี้ (รูปที่ 36.6)

2. การเปิดรับเซลล์ให้ทริปซินโดยสังเขป

3. การกำจัดทริปซินและการแพร่กระจายในตัวกลาง

4. การฟักตัวของเซลล์ให้กลมขึ้น

5. การแขวนเซลล์ใหม่ในตัวกลางสำหรับการนับและการงอกใหม่

6. เซลล์เพาะและเติบโตเป็นชั้นเดียว

ความเข้มข้นของเซลล์ที่วัฒนธรรมย่อย:

เซลล์ที่ต่อเนื่องกันส่วนใหญ่ได้รับการเพาะเลี้ยงย่อยที่ความเข้มข้นของการเพาะระหว่าง 1 × 10 4 และ 5 × 10 4 เซลล์/มล. อย่างไรก็ตาม สำหรับวัฒนธรรมใหม่ วัฒนธรรมย่อยจะต้องเริ่มต้นที่ความเข้มข้นสูงและค่อยๆ ลดลง

ประเภท # 2 วัฒนธรรมการระงับ:

เซลล์ที่ต่อเนื่องกันส่วนใหญ่เติบโตเป็นชั้นเดียว เซลล์บางชนิดที่ไม่ยึดติด NS. เซลล์ของมะเร็งเม็ดเลือดขาวหรือเซลล์บางชนิดที่สามารถถูกกักขังในกลไกทางกลไกสามารถแพร่กระจายในสารแขวนลอยได้ เซลล์ที่ถูกแปลงสภาพจะถูกเพาะเลี้ยงย่อยด้วยวิธีนี้ การเพาะเลี้ยงย่อยโดยสารแขวนลอยเปรียบได้กับการเพาะเลี้ยงแบคทีเรียหรือยีสต์

ข้อดีของการขยายพันธุ์เซลล์โดยการระงับ:

ผม. กระบวนการขยายพันธุ์เร็วขึ้น

ii. ระยะเวลาล่าช้ามักจะสั้นลง

สาม. ส่งผลให้เซลล์แขวนลอยเป็นเนื้อเดียวกัน

iv. ไม่จำเป็นต้องใช้ทริปซิน

vi. ไม่จำเป็นต้องเปลี่ยนสื่อบ่อยๆ

viii. การผลิตเซลล์จำนวนมากสามารถทำได้สะดวก

เกณฑ์สำหรับวัฒนธรรมย่อยแขวนลอย:

เกณฑ์ที่ใช้สำหรับวัฒนธรรมย่อยแบบแขวนลอยเหมือนกับที่ได้อธิบายไว้แล้วสำหรับวัฒนธรรมย่อยแบบชั้นเดียว

ต้องพิจารณาประเด็นต่อไปนี้:

ii. การเปลี่ยนแปลงค่า pH แสดงถึงความอ่อนล้าปานกลาง

สาม. กำหนดเวลาของวัฒนธรรมย่อย

เทคนิคการแขวนลอยวัฒนธรรม:

เซลล์สามารถถูกแขวนลอยในขวดเพาะเชื้อ (ขวดคนกวน) ที่มีตัวกลางที่ต้องการ (รูปที่ 36.7) ตัวกลางกวนอย่างต่อเนื่องด้วยลูกตุ้มแม่เหล็กที่หมุนอยู่ที่ฐานของขวด เซลล์ต้องตรวจสอบการปนเปื้อนหรือสัญญาณของการเสื่อมสภาพเป็นระยะ

บทความที่เกี่ยวข้อง:

ยินดีต้อนรับสู่ BiologyDiscussion! ภารกิจของเราคือการจัดหาแพลตฟอร์มออนไลน์เพื่อช่วยให้นักเรียนได้แบ่งปันบันทึกย่อในวิชาชีววิทยา เว็บไซต์นี้ประกอบด้วยบันทึกการศึกษา งานวิจัย บทความ บทความ และข้อมูลพันธมิตรอื่นๆ ที่ส่งโดยผู้เยี่ยมชมเช่นคุณ

ก่อนแบ่งปันความรู้ของคุณบนเว็บไซต์นี้ โปรดอ่านหน้าต่อไปนี้:

คำถาม

สารบัญ

เกี่ยวกับเรา

ข้อเสนอแนะ

คำถามและคำตอบใหม่และหมวดหมู่ฟอรัม

เป็นกระดานถามตอบสำหรับนักเรียน อาจารย์ และผู้เยี่ยมชมทั่วไป เพื่อแลกเปลี่ยนบทความ คำตอบ และบันทึกย่อ ตอบตอนนี้และช่วยเหลือผู้อื่น


บรรจบกัน

สิ่งเหล่านี้เป็นส่วนหนึ่งของรูปแบบของความเสี่ยงจากไฟไหม้ที่เพิ่มขึ้น ซึ่งเกิดขึ้นจากการบรรจบกันของปัจจัยที่เลวร้ายลงโดยมนุษย์ ตั้งแต่การจุดไฟไปจนถึงการวางผังเมือง การจัดการป่าไม้ ไปจนถึงการเปลี่ยนแปลงสภาพภูมิอากาศ

แม้ว่าเหตุการณ์ประหลาดที่อาจมาบรรจบกันอาจทำให้หลายคนประหลาดใจ แต่ก็ไม่น่าแปลกใจเลยที่ Lyric Jain วิศวกรวัย 24 ปีที่ได้รับการศึกษาจากเคมบริดจ์ซึ่งอาศัยอยู่ในสหราชอาณาจักร

อย่างไรก็ตาม ต้องขอบคุณการบรรจบกันของเหตุการณ์ต่างๆ ตั้งแต่การปะทะกันของอุตสาหกรรมค้าปลีกในวงกว้างไปจนถึงการเติบโตของ Amazon โดยเฉพาะ ศูนย์เติมเต็มทั้งขนาดใหญ่และขนาดเล็กกำลังเริ่มผุดขึ้นอย่างรวดเร็ว

จากนั้นในชั่วข้ามคืน การบรรจบกันของสองกองกำลังที่ทรงพลังได้ลดขนาดสิ่งที่ดูเหมือนเป็นตารางเวลาที่ยาวนาน

สำหรับอุตสาหกรรมการพิมพ์ การบรรจบกันของการเปลี่ยนแปลงนี้ส่งผลกระทบอย่างใหญ่หลวงต่อรายได้จากการโฆษณา

ใกล้กับจุดบรรจบของแม่น้ำสองสายนี้มีสะพานเล็กๆ ทอดข้ามช่องว่างระหว่างแม่น้ำ Korengal กับ Pech

อาจเป็นการบรรจบกันของปัจจัยต่างๆ แต่การไปนกอินทรีหัวล้านก็ไม่ใช่ทางเลือกที่คาดหวังมากนัก

การบรรจบกันของเหตุการณ์ที่ดูเหมือนมีมนต์ขลังสร้างขึ้นสำหรับการถ่ายทำภาพยนตร์ที่มีเสน่ห์เป็นส่วนใหญ่

ในเวลาเดียวกัน ในการบรรจบกันอย่างมีความสุขของเทคโนโลยีและประวัติศาสตร์ บุชมีแอปบน iPad ของเขาที่เขาสามารถใช้วาดภาพได้

เป็นการอ่านที่ยุติธรรมหรือคุณเห็นการบรรจบกันระหว่างคุณกับ Reihan/Ross มากกว่าที่ฉันแนะนำ?

วอชิงตันโจมตีค่ายของฝรั่งเศสที่จุดบรรจบกันของอัลเลกานีและโมนอนกาเฮลา

ที่จุดบรรจบกันของแม่น้ำสองสายนี้ มีกลุ่มคนป่าที่ดีที่สุดที่ฉันเคยเห็นมา

กุ้งตัวเล็ก387 ขึ้นไปถึงภูเขา,388 และยิ่งใหญ่เท่าที่บรรจบกันของ Indus และ Acesines

Erdil เป็นหมู่บ้านคริสเตียนเล็กๆ ที่ถูกทิ้งร้าง ตั้งอยู่ในหุบเขา Oramar เหนือจุดบรรจบกับ Zab เล็กน้อย

ระหว่างแม่น้ำเหล่านี้ และตั้งอยู่ภายในจุดบรรจบกันของแม่น้ำเหล่านี้ Harper's Ferry ได้พักผ่อน


วิธีการในชีววิทยาเมทริกซ์นอกเซลล์

โรนัลด์ เจ. มิดูรา , . Vincent C. Hascall , in Methods in Cell Biology , 2018

6.1.3 เนื้อเยื่อ

ซึ่งแตกต่างจากการเพาะเลี้ยงเซลล์ เนื้อเยื่อมี ECM ในปริมาณที่มากกว่ามากและต้องการการย่อยที่รุนแรงมากขึ้นเพื่อปลดปล่อย GAG และ DNA เราแนะนำให้เพิ่ม 250 ไมโครลิตรของสารละลายสต็อก PK 1 มก./มล. ต่อน้ำหนักเปียก 100 มก. ของเนื้อเยื่อ

บันทึก: รักษาการวัดที่แม่นยำของน้ำหนักเปียกของเนื้อเยื่อและจำนวนเซลล์โดยประมาณต่อพื้นผิวของวัฒนธรรม เนื่องจากค่าเหล่านี้ใช้เพื่อประเมินปริมาณของ chondroitinase ABC ที่จำเป็นต่อการย่อย HA อย่างสมบูรณ์ (ขั้นตอนที่ 6.3) และปริมาตรของสารละลาย AMAC ที่จำเป็นสำหรับการติดฉลากอย่างเหมาะสม ของไดแซ็กคาไรด์ที่ไม่อิ่มตัวของ HA (ขั้นตอนที่ 6.5)

ฟักตัวอย่างที่อุณหภูมิ 60°C จนกว่าเนื้อเยื่อ/ชั้นเซลล์จะถูกย่อย จากประสบการณ์ของเรา การย่อยอาหาร 2 ชั่วโมงควรจะเพียงพอเพื่อให้เกิดการย่อยที่สมบูรณ์ของเซลล์และเนื้อหา ECM ที่มีเซลล์มากถึง 1.0 ล้านเซลล์ ชั้นเซลล์ที่มีเซลล์ 2–5 ล้านเซลล์มักจะต้องใช้เวลา 3-4 ชั่วโมงเพื่อให้แน่ใจว่าการย่อยอาหารอย่างละเอียดถี่ถ้วน เราขอแนะนำให้ใช้เวลาย่อยอาหารเท่ากันสำหรับตัวอย่างอาหารเลี้ยงเชื้อสำหรับตัวอย่างชั้นเซลล์ตามลำดับ สำหรับเนื้อเยื่อ เนื้อเยื่อแต่ละประเภทมักจะต้องใช้เวลาในการย่อยที่แตกต่างกันเพื่อให้ได้กระแสน้ำวนของการย่อยอาหารอย่างละเอียดถี่ถ้วนทุกๆ 30 นาที จนกว่าเนื้อเยื่อจะละลายหมด ตัวอย่างเช่น เนื้อเยื่อสมองจะละลายใน 3-4 ชั่วโมง (ขึ้นอยู่กับอายุ) แต่เนื้อเยื่อตับมักต้องใช้เวลา 5-6 ชั่วโมงเพื่อให้มั่นใจว่าผลการย่อยอาหารจะสมบูรณ์ ในบางกรณีที่รุนแรง เช่น กระดูกอ่อนไฮยาลิน ตัวอย่างเนื้อเยื่ออาจต้องใช้เวลาในการย่อยนานขึ้น หลังจากการย่อยอาหารเสร็จสิ้น เราแนะนำให้เก็บส่วนลิโควตเล็กน้อยจากตัวอย่างแต่ละตัวอย่างเพื่อการวิเคราะห์ดีเอ็นเอ (ดูหัวข้อที่ 9 ) สำหรับตัวอย่างน้ำหนักเปียกของเนื้อเยื่อ 100 มก. ที่ย่อยใน 250 ไมโครลิตร โดยปกติเราจะเอาส่วนลิคอต 5 ไมโครลิตรออกสำหรับการวิเคราะห์ดีเอ็นเอ สำหรับตัวอย่างชั้นเซลล์ที่เพาะเลี้ยงที่ย่อยใน 1 มล. โดยปกติเราจะเอาส่วนลิคอต 25 ไมโครลิตรออกสำหรับการวิเคราะห์ดีเอ็นเอ หากไม่ดำเนินการไปยังการตกตะกอนของเอทานอลครั้งแรกทันที (ขั้นตอนที่ 6.2) การย่อยตัวอย่างที่เหลือสามารถเก็บไว้ที่ -20 °C


เซลล์สร้างกระดูกที่ได้จากมีเซนไคม์มีบทบาทสำคัญในการสร้างกระดูกผ่านการสังเคราะห์และการทำให้เป็นแร่ของกระดูกและการสร้างกระดูกใหม่ Osteoclasts เป็นเซลล์หลายนิวเคลียสของแหล่งกำเนิดเม็ดเลือดที่มีบทบาทในการสลายกระดูก ในที่นี้ เราอธิบายโปรโตคอลสำหรับการสร้างวัฒนธรรมเบื้องต้นของเซลล์ทั้งสองประเภทนี้จากเนื้อเยื่อกระดูก ซึ่งรวมถึงกระดูกโคนขา กระดูกหน้าแข้ง และกระดูกต้นแขนของหนูตัวน้อย เราอธิบายวิธีการจัดการกับกิจกรรมและ/หรือความแตกต่าง ซึ่งช่วยให้สามารถศึกษาผลกระทบของการรักษาต่างๆ ระหว่างหรือหลังการแยกความแตกต่าง อดีตร่างกาย.

สำหรับตัวอย่างเชิงปฏิบัติเพิ่มเติมของการใช้โปรโตคอลเหล่านี้ โปรดดูที่ Chevalier et al (2020).


การอภิปราย

ปัจจัยที่สำคัญที่สุดสำหรับการทดสอบคราบพลัคที่ประสบความสำเร็จนั้นอยู่ที่การปรับให้เหมาะสมของโปรโตคอลสำหรับการเพาะเชื้อเฉพาะที่เป็นปัญหา เนื่องจากเงื่อนไขอาจแตกต่างกันอย่างมีนัยสำคัญ ประเด็นสำคัญที่ต้องคำนึงถึงคือ: ความเข้ากันได้ของเซลล์โฮสต์กับไวรัสที่เป็นปัญหา สภาพการเติบโตของไวรัสที่เหมาะสม ช่วงการเจือจางที่เพียงพอเพื่อแยกความแตกต่างของคราบจุลินทรีย์อย่างชัดเจน และแก้ไขการเลือกซ้อนทับและการย้อมสีของเซลล์และไวรัสที่เป็นปัญหา

แม้ว่า VEEV และ RVFV ทั้งสองจะเติบโตภายใต้สภาวะที่คล้ายคลึงกันมากโดยใช้เซลล์เจ้าบ้านที่เหมือนกันหลายชนิด ความแตกต่างของสัณฐานวิทยาของคราบจุลินทรีย์และจลนพลศาสตร์ของการเจริญเติบโตนั้นแตกต่างกันอย่างมาก เมื่อใช้เซลล์ Vero สำหรับการตรวจคราบพลัค ซึ่งตามธรรมเนียมแล้วใช้เป็นเซลล์สืบพันธุ์และเซลล์บ่งชี้สำหรับไวรัสไข้เลือดออกและอัลฟาไวรัส โดยทั่วไป VEEV จะเติบโตจนถึงระดับที่สูงกว่า RVFV และแสดงให้เห็นถึงจลนพลศาสตร์การจำลองแบบที่เพิ่มขึ้น ทำให้เกิดคราบพลัคขนาดใหญ่ที่ 48 แรงม้า 4 10 – 12 . ตรงกันข้ามกับ VEEV RVFV ต้องการ 72 แรงม้า และแสดงให้เห็นแผ่นโลหะที่ปกติแล้วจะเล็กกว่ามากและมีขนาดไม่เท่ากัน

ตรงกันข้ามกับ RVFV และ VEEV ไวรัสไข้หวัดใหญ่เป็นเซลล์ที่มีความจำเพาะสูงและอาจแพร่กระจายได้ยากผ่านการเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อ สำหรับไวรัสไข้หวัดใหญ่ การเข้าและหลอมรวมของไวรัสโดยปกติเริ่มต้นโดยการจับตัวรับที่ผิวเซลล์กับไวรัสไกลโคโปรตีน ฮามากกลูตินิน (HA) ซึ่งจะเป็นสื่อกลางในการเข้าสู่เซลล์เป้าหมายโดยจับกับกรดไซลิกของเซลล์เจ้าบ้าน ตัวรับพื้นผิว HA คือไตรเมอร์ริกไกลโคโปรตีนที่มีอยู่ในเยื่อหุ้มเยื่อหุ้มของไวรัสไข้หวัดใหญ่ทั้งหมด และต้องการการแตกแยกเข้าไปในหน่วยย่อย HA1 และ HA2 โดยโปรตีเอสของเซลล์เจ้าบ้านจำเพาะ เพื่อทำให้ปัญหาซับซ้อนยิ่งขึ้น ตำแหน่งความแตกแยกเหล่านี้มักจะแตกต่างกันระหว่างสายพันธุ์ไวรัส 13 เนื่องจากการแสดงออกของโปรตีเอสที่มีความสามารถในการตัดแยก HA ถูกจำกัดไว้เฉพาะเนื้อเยื่อ โปรตีเอสมักถูกเติมลงในอาหารเลี้ยงเชื้อเซลล์เพื่ออำนวยความสะดวกในการหลอมรวมของไวรัสและเข้าสู่เซลล์เจ้าบ้านที่เลือก 13 TPCK-trypsin เป็นตัวอย่างหนึ่งของโปรตีเอสที่ใช้กันทั่วไปซึ่งใช้ในการเพาะเลี้ยงเซลล์กับทั้งเซลล์ MDCK และ Vero: อำนวยความสะดวกในการจำลองแบบหลายรอบ (ในกรณีที่ไม่มีเซรั่มที่ยับยั้งเอนไซม์ trypsin) ผ่านการกระตุ้นการสลายโปรตีนของไวรัส HA 14,15

ตามที่แสดงให้เห็นในการศึกษานี้และอื่นๆ ความแตกต่างในวัฏจักรชีวิตของไวรัสสามารถส่งผลต่อการเลือกโอเวอร์เลย์ รูปแบบเพลต และเวลารวบรวม โดยมีความแปรปรวนอย่างมีนัยสำคัญระหว่างประเภทและชนิดของไวรัสที่แตกต่างกัน ในการศึกษาของเรา การซ้อนทับของ agarose แสดงให้เห็นแผ่นโลหะที่ชัดเจนกว่าในระดับไทเตอร์ที่สูงกว่า CMC หรือการวางซ้อนของเหลวสำหรับทั้งไวรัส RVFV และไวรัสไข้หวัดใหญ่ B ซึ่งช่วยเสริมประโยชน์ใช้สอยในไวรัสและเซลล์ประเภทต่างๆ การใช้ agarose ที่มีความเข้มข้นต่ำในขั้นสุดท้ายช่วยอย่างมากในการถอดปลั๊กที่เป็นของแข็งและทำให้การย้อมสีง่ายขึ้น โดยรวมแล้ว CMC แสดงให้เห็นถึงประสิทธิภาพที่แย่ที่สุดในฐานะโอเวอร์เลย์สำหรับไวรัสทั้งสามตัวที่ทดสอบและผลิตแผ่นโลหะขนาดเล็กมากและไม่ชัดเจนสำหรับไวรัสไข้หวัดใหญ่ บี แม้ว่า CMC โดยรวมจะแสดงคุณลักษณะที่ต้องการน้อยที่สุด แต่การใช้ CMC ในไวรัสที่เติบโตอย่างรวดเร็วและรุนแรงอย่างยิ่งสามารถพิสูจน์ได้ว่าเป็นประโยชน์ เนื่องจากดูเหมือนว่าจะลดขนาดของคราบพลัคโดยลดระดับไทเทอร์เพียงเล็กน้อยเท่านั้น โอเวอร์เลย์ของเหลวได้รับการพิสูจน์แล้วว่าใช้งานได้หลากหลายที่สุด เนื่องจากเตรียมง่ายสุดๆ ใช้งานง่ายขึ้น และเทียบได้กับ agarose ในไวรัสทั้งหมดที่เลือก ในรูปแบบเพลท 96 หลุมปริมาณงานที่สูงขึ้น การใช้งานและการกำจัดไม่ถูกยับยั้งเนื่องจากการแข็งตัวเช่นเดียวกับการซ้อนทับแบบเดิม และให้ผลลัพธ์ที่แม่นยำและสม่ำเสมอ การพิจารณาเมื่อใช้ของเหลวที่ซ้อนทับอยู่ในสีที่ทึบแสงและไม่สามารถตรวจสอบการก่อตัวของคราบจุลินทรีย์ได้ เนื่องจากแผ่นเปลือกโลกไม่สามารถเคลื่อนย้ายได้จนถึงจุดที่รวบรวม ซึ่งจำกัดการปรับตัวนี้ให้เข้ากับไวรัสที่มีจลนพลศาสตร์การจำลองแบบที่มีลักษณะเฉพาะก่อนหน้านี้

การปรับเปลี่ยนเล็กน้อยในสภาวะการทดสอบคราบพลัคสามารถเปลี่ยนแปลงผลลัพธ์ได้อย่างมีนัยสำคัญ และรับประกันการประเมินและประสิทธิภาพของระบบหรือเทคนิคใหม่ ๆ เสมอ แม้ว่าจะไม่มีโปรโตคอลการทดสอบคราบพลัคที่ปรับให้เหมาะสมและได้มาตรฐานในทุกสถานการณ์ รายงานของเราแสดงให้เห็นถึงความเก่งกาจและความสะดวกในการใช้งานทั้งแบบดั้งเดิมและแบบเคลือบของเหลวแบบใหม่สำหรับการทดสอบคราบพลัค ในขณะที่ให้พื้นหลังที่เพียงพอสำหรับการปรับเปลี่ยนผู้ใช้เพิ่มเติม


การเติบโตแบบทวีคูณ

แบบจำลองการเติบโตแบบเอ็กซ์โพเนนเชียลใช้กับสถานการณ์ใดๆ ที่การเติบโตเป็นสัดส่วนกับขนาดปัจจุบันของปริมาณดอกเบี้ย

แบบจำลองการเติบโตแบบทวีคูณมักใช้สำหรับสถานการณ์ในโลกแห่งความเป็นจริง เช่น ดอกเบี้ยที่ได้รับจากการลงทุน จำนวนประชากรมนุษย์หรือสัตว์ การเติบโตของวัฒนธรรมแบคทีเรีย เป็นต้น

แบบจำลองการเติบโตแบบเลขชี้กำลังทั่วไปคือ

โดยที่ C คือจำนวนหรือตัวเลขเริ่มต้น r คืออัตราการเติบโต (เช่น อัตราการเติบโต 2% หมายถึง r = 0.02 ) และ t คือเวลาที่ผ่านไป

ประชากร 32, 000 ที่มีอัตราการเติบโต 5% ต่อปีจะถูกจำลองโดยสมการ:

บางครั้ง คุณอาจได้รับอัตราการเพิ่มเป็นสองเท่าหรือสามเท่า แทนที่จะเป็นอัตราการเติบโตเป็นเปอร์เซ็นต์ ตัวอย่างเช่น หากคุณได้รับแจ้งว่าจำนวนเซลล์ในการเพาะเชื้อแบคทีเรียเพิ่มขึ้นเป็นสองเท่าทุก ๆ ชั่วโมง สมการในการจำลองสถานการณ์จะเป็นดังนี้:

สมมติว่ามีการเพาะเชื้อแบคทีเรีย 100 ตัวในจานเพาะเชื้อ และวัฒนธรรมนั้นจะเพิ่มขนาดเป็นสองเท่าทุก ๆ ชั่วโมง ทำนายจำนวนแบคทีเรียที่จะอยู่ในจานหลังจากผ่านไป 12 ชั่วโมง

P ( 12 ) = 100 &sdot 2 12 = 409 , 600 แบคทีเรีย

ดาวน์โหลดแอปเครื่องมือการเรียนรู้ฟรีของเราและหนังสือเตรียมสอบ

ชื่อของการทดสอบที่ได้มาตรฐานเป็นของผู้ถือเครื่องหมายการค้าและไม่มีส่วนเกี่ยวข้องกับ Varsity Tutors LLC

4.9/5.0 คะแนนความพึงพอใจในช่วง 100,000 เซสชันล่าสุด ณ วันที่ 27/4/61

เครื่องหมายการค้าของร้านสื่อเป็นของสื่อที่เกี่ยวข้องและไม่มีส่วนเกี่ยวข้องกับ Varsity Tutors

การอ้างสิทธิ์ที่ได้รับรางวัลตามรางวัล CBS Local และ Houston Press

Varsity Tutors ไม่มีส่วนเกี่ยวข้องกับมหาวิทยาลัยที่กล่าวถึงในเว็บไซต์

Varsity Tutors เชื่อมต่อผู้เรียนกับผู้เชี่ยวชาญ ผู้สอนเป็นผู้รับเหมาอิสระที่ปรับแต่งบริการให้เข้ากับลูกค้าแต่ละราย โดยใช้สไตล์ วิธีการ และวัสดุของตนเอง


รีเอเจนต์และโซลูชั่น

ใช้น้ำกลั่นปราศจากไอออนในสูตรและขั้นตอนของโปรโตคอลทั้งหมด สำหรับโซลูชันหุ้นสามัญ โปรดดูที่ ภาคผนวก ไม่พร้อมใช้งาน

C6/36 อาหารเลี้ยงเชื้อ

  • เพนิซิลลิน/สเตรปโตมัยซิน 20 มล. (เช่น ThermoFisher, cat. no. 15140122)
  • 100 ml fetal bovine serum (FBS เช่น Sigma, cat. no. F7942)
  • 880 มล. Essential Medium Eagle ขนาด 880 มล. (MEME เช่น Sigma, cat. no. M0643-10X1L)
  • กรองฆ่าเชื้อ (0.2 µm) และเก็บที่อุณหภูมิ 4°C ได้นานถึง 4 ถึง 6 สัปดาห์

สารละลายคาร์บอกซีเมทิลเซลลูโลส (CMC)

  • ผง CMC . 32 กรัม
  • น้ำกลั่น 500 มล.
  • นำปริมาตรเป็น 1 ลิตร ด้วยน้ำกลั่น
  • ผสมกับแท่งกวนแม่เหล็กที่อุณหภูมิ 100°C เป็นเวลา 4 ถึง 6 ชั่วโมง (อย่าให้เดือด) จนเป็นเนื้อเดียวกัน

Autoclave ที่ 121°C เป็นเวลา 10 นาที และเก็บที่อุณหภูมิห้องได้นานถึง 6 เดือน

ค่อยๆ เติมผง CMC ลงในกระแสน้ำที่กวน มิฉะนั้นจะจับเป็นก้อนหรือเกาะติดกับก้นบีกเกอร์

โอเวอร์เลย์ CMC/DMEM

สารละลาย CMC แบบอุ่น (ดูสูตร) ​​และ DMEM/2% FBS (ดูสูตร) ​​ถึง 37°C รวมโซลูชัน CMC ในปริมาณที่เท่ากันและ DMEM/2% FBS ผสมกับแท่งกวนแม่เหล็กปลอดเชื้อหรือปิเปตเซรั่ม 25 มล. เก็บที่อุณหภูมิ 4°C ได้นานถึง 4 ถึง 6 สัปดาห์

น้ำยาย้อมคริสตัลไวโอเล็ต

  • ผงคริสตัลไวโอเล็ต 10 กรัม
  • 300 มล. เอทานอล 100%
  • ฟอร์มาลดีไฮด์ 200 มล.
  • นำปริมาตรสุดท้ายได้ถึง 1 ลิตรด้วย DPBS (ดูสูตร)

เก็บในขวดสีเหลืองอำพันที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 4 ถึง 6 สัปดาห์

ละลายผงคริสตัลไวโอเล็ตในเอทานอลก่อน แล้วค่อยๆ ผสมโดยการหมุนและเขย่าเบาๆ เพื่อให้แน่ใจว่าผงละลายหมด

หลังจากเติมฟอร์มาลดีไฮด์และนำปริมาตรรวมเป็น 1 ลิตรด้วย DPBS แล้ว คนด้วยแท่งกวนแม่เหล็กเป็นเวลา 30 นาที

เก็บให้พ้นแสงแดดโดยตรง

สื่อ Eagle ที่ดัดแปลงของ Dulbecco (DMEM)/2% FBS

  • เซรั่มวัวในครรภ์ 20 มล. (FBS)
  • DMEM 980 มล. (เช่น Sigma, cat. no. D6546)
  • กรองฆ่าเชื้อ (0.2 µm) และเก็บที่อุณหภูมิ 4°C ได้นานถึง 4 ถึง 6 สัปดาห์

น้ำเกลือบัฟเฟอร์ฟอสเฟต (DPBS) ของ Dulbecco

รับโซลูชัน 1× DPBS (ดู ภาคผนวก ไม่พร้อมใช้งานหรือซื้อ) กรองฆ่าเชื้อ (0.2 µm) และนึ่งฆ่าเชื้อที่อุณหภูมิ 121°C เป็นเวลา 20 นาที เก็บที่อุณหภูมิห้องได้นานถึง 6 เดือน

  • 15 ml 5 M NaCl
  • 5 ml 1 M Tris·Cl, pH 8.0 (ดู ภาคผนวกไม่พร้อมใช้งาน)
  • 1 มล. 500 mM EDTA
  • นำปริมาตรสุดท้ายขึ้นไป 500 มล. ด้วยน้ำกลั่นแล้วคนด้วยแท่งกวนแม่เหล็กเป็นเวลา 30 นาที
  • กรองฆ่าเชื้อ (0.2 µm) และเก็บที่อุณหภูมิ 4°C เป็นเวลา 4 ถึง 6 สัปดาห์

TNE/25% กลีเซอรอล

  • TNE 75 มล. (ดูสูตร)
  • กลีเซอรอล 25 มล. (เช่น Sigma, cat. no. G5516)
  • ผัดด้วยแท่งแม่เหล็กเป็นเวลา 10 นาที
  • กรองฆ่าเชื้อ (0.2 µm) และเก็บที่อุณหภูมิ 4°C เป็นเวลา 4 ถึง 6 สัปดาห์

อาหารเลี้ยงเชื้อ Vero E6

  • เพนิซิลลิน/สเตรปโตมัยซิน 20 มล./แอล-กลูตามีน (เช่น ThermoFisher, cat. no. 10378016)
  • 100 มล. เซรั่มวัวในครรภ์ (FBS)
  • อาหาร Eagle ดัดแปลงของ Dulbecco ขนาด 880 มล. (DMEM)
  • กรองฆ่าเชื้อ (0.2 µm) และเก็บที่อุณหภูมิ 4°C ได้นานถึง 4 ถึง 6 สัปดาห์

การนำเสนอทางคลินิกและประวัติธรรมชาติของมะเร็งปากมดลูก

มะเร็งปากมดลูกอาจมีการนำเสนอทางคลินิกที่หลากหลาย อาจพบได้ในการตรวจ Papicolaou (Pap) ตามปกติในผู้ป่วยหญิงที่ไม่มีอาการ อาจมีเลือดออกทางช่องคลอดผิดปกติ หรือในระยะสุดท้าย ผู้ป่วยอาจมีอาการของก้อนเนื้อหรือโรคในระยะแพร่กระจาย ปากมดลูกที่เป็นมะเร็งระยะแรกมีลักษณะเป็นเม็ดเล็กๆ หรือถูกกัดเซาะไม่ดี และมีเลือดออกง่ายเมื่อสัมผัส ในระยะต่อมา ปรากฏเป็นก้อนกลม, แผลเป็นแผลหรือมวล exophytic การเจริญเติบโตของเอนโดไฟต์เกิดขึ้นในคลองปากมดลูกโดยแทรกซึมเข้าไปในผนังโดยตรงทำให้เกิดการขยายตัวแบบกระจายและการแข็งตัวของปากมดลูก พื้นผิวของเยื่อเมือกอาจถูกปกคลุมด้วยเยื่อบุผิวปกติ และเซลล์มะเร็งที่อยู่เบื้องล่างอาจหลบหนีการตรวจพบโดยการตรวจทางเซลล์วิทยา มะเร็งปากมดลูกบางชนิดจะอยู่ในคลองปากมดลูกและเจริญโดย endophytically โดยไม่ก่อให้เกิดความผิดปกติอย่างร้ายแรง เมื่อปากมดลูกขยายใหญ่ เทอะทะ และมีขนาดใหญ่กว่า 6 ซม. จะเรียกว่าปากมดลูกรูปทรงกระบอก ลักษณะโดยรวมนี้สามารถเห็นได้ในเนื้องอกทุกประเภท แม้ว่าโดยทั่วไปจะเกี่ยวข้องกับมะเร็งต่อมลูกหมากก็ตาม

การขยายมะเร็งปากมดลูกในพื้นที่ดำเนินการในลักษณะที่คาดการณ์ได้ว่าจะเกี่ยวข้องกับเยื่อบุโพรงมดลูกอย่างเหนือชั้นและช่องคลอดส่วนบนด้อยกว่า การมีส่วนร่วมของพารามิเตอร์เป็นผลมาจากการขยายผ่าน stroma ปากมดลูกหรือการบุกรุกพื้นที่น้ำเหลืองและหลอดเลือด จากพารามีเทรียม เนื้องอกอาจขยายออกไปด้านข้างถึงผนังอุ้งเชิงกราน ข้างหน้าถึงฐานกระเพาะปัสสาวะ หรือด้านหลังถึงไส้ตรง รูปแบบการแพร่กระจายที่ผิดปกติอยู่ในรูปของมะเร็ง ในที่เกิดเหตุ ขยายไปถึงเยื่อบุโพรงมดลูกและ/หรือท่อนำไข่

สหพันธ์สูตินรีแพทย์และสูตินรีแพทย์นานาชาติ (FIGO) ได้ปรับปรุงระบบการแสดงละครทางคลินิกในปี 2552 โดยคำนึงถึงปัญหาของการผ่าตัดและการผ่าตัดทางคลินิก การบุกรุกในระยะเริ่มต้นที่คล้อยตามการรักษาแบบอนุรักษ์นิยมมากขึ้น และประโยชน์ของขั้นตอนย่อยเพิ่มเติม รวมถึงข้อพิจารณาอื่นๆ 12 , 13 แนวทางการแสดงละครในปัจจุบันมีดังต่อไปนี้ (ตารางที่ 1)

ตารางที่ 1. คำจำกัดความของการแสดงละครทางคลินิกของ FIGO สำหรับมะเร็งปากมดลูก

มะเร็งถูกกักบริเวณปากมดลูกอย่างเคร่งครัด (ไม่ควรคำนึงถึงการขยายไปยังคลังข้อมูล)

มะเร็งระยะลุกลามระบุเฉพาะการบุกรุกด้วยกล้องจุลทรรศน์จำกัดเฉพาะการบุกรุกของ stromal ที่มีความลึกสูงสุด 5 มม. และกว้างไม่เกิน 7 มม. (ความลึกของการบุกรุกไม่ควรเกิน 5 มม. จากฐานของเยื่อบุผิว ไม่ว่าพื้นผิวหรือต่อม ทำให้เกิดการมีส่วนร่วมของพื้นที่หลอดเลือดไม่ว่าจะทางหลอดเลือดดำหรือน้ำเหลืองไม่ควรเปลี่ยนการแสดงละคร)

วัดการบุกรุกของสโตรมา &le3 มม. ลึก และ &le7 มม. กว้าง

วัดการบุกรุกของสโตรมา >3 มม. และ <5 มม. ลึกและ &le7 มม.

รอยโรคทางคลินิกที่จำกัดอยู่ที่ปากมดลูกหรือรอยโรคพรีคลินิกที่มากกว่าระยะ IA

แผลทางคลินิกขนาดไม่เกิน 4 ซม.

แผลทางคลินิกที่มีขนาดมากกว่า 4 ซม.

มะเร็งขยายเกินปากมดลูกแต่ยังไม่ขยายไปถึงผนังอุ้งเชิงกรานหรือส่วนล่างที่สามของช่องคลอด

การมีส่วนร่วมมากถึงสองในสามของช่องคลอดโดยไม่มีการมีส่วนร่วมที่ชัดเจน

รอยโรคที่มองเห็นได้ทางคลินิก &le4 cm

รอยโรคที่มองเห็นได้ทางคลินิก >4 cm

การมีส่วนร่วมของพารามิเตอร์ที่ชัดเจนโดยไม่เกี่ยวข้องกับผนังอุ้งเชิงกราน

มะเร็งขยายไปถึงผนังอุ้งเชิงกรานในการตรวจทางทวารหนัก ไม่มีช่องว่างที่ปราศจากมะเร็งระหว่างเนื้องอกกับผนังอุ้งเชิงกราน เนื้องอกเกี่ยวข้องกับส่วนล่างที่สามของช่องคลอด ทุกกรณีที่มีภาวะไฮโดรเนโฟซิสหรือไตทำงานผิดปกติรวมอยู่ด้วย เว้นแต่จะทราบ เกิดจากสาเหตุอื่นๆ

มะเร็งได้แพร่กระจายไปยังส่วนล่างที่สามของช่องคลอดแต่ไม่ลามไปถึงผนังอุ้งเชิงกราน

มะเร็งขยายไปถึงผนังอุ้งเชิงกราน หรือมีภาวะไตวายน้ำ/ไตไม่ทำงาน

มะเร็งขยายเกินกระดูกเชิงกรานจริงหรือเกี่ยวข้องกับเยื่อเมือกของกระเพาะปัสสาวะหรือไส้ตรง

กระจายไปยังอวัยวะอุ้งเชิงกรานที่อยู่ติดกัน

ดัดแปลงมาจากการแสดงละครของ FIGO สำหรับมะเร็งของช่องคลอด ปากมดลูก และคอร์ปัสมดลูก คณะกรรมการ FIGO ด้านเนื้องอกวิทยาทางนรีเวช Int J Gynaecol Obstet 2014125(2):97-8. 14


การสร้างเซลล์ต้นกำเนิด Pluripotent ที่ชักนำโดยมนุษย์ (iPSC) จากเซลล์โซมาติกปฐมภูมิ

การตั้งโปรแกรมใหม่ของเซลล์ประกอบด้วยการเปลี่ยนเซลล์ที่แยกจากกันเป็นเซลล์ที่มีพลูริโพเทนต์ซึ่งเรียกว่าเซลล์ต้นกำเนิดพลูริโพเทนต์ที่เหนี่ยวนำ iPSC สามารถคล้อยตามการจัดการในหลอดทดลอง และในทางทฤษฎีแล้ว การผลิตโดยตรงของเซลล์ชนิดใดๆ ที่มีความแตกต่าง นอกจากนี้ ยังสามารถได้รับ iPSC จากผู้ป่วย และต่อมาใช้สำหรับการสร้างแบบจำลองโรค การค้นพบยา และการบำบัดฟื้นฟู การผลิต iPSC เกิดขึ้นได้เป็นครั้งแรกโดยการแปลงสัญญาณด้วยการใช้ retroviral vectors ปัจจัยการถอดรหัสเฉพาะสี่ประการ: Oct4, Klf4, Sox2 และ c-Myc (OKSM) เป็นเซลล์หลักในวัฒนธรรม Takahashi และ Yamanaka (เซลล์ 126(4):663 –676, 2549). มีการเสนอโปรโตคอลทางเลือกมากมาย: การถ่ายซ้ำของพลาสมิดการแสดงออกที่มียีนที่เกี่ยวข้องกับ pluripotency สี่ตัว Okita et al (วิทยาศาสตร์ 322(5903):949–953, 2008), การส่งมอบ lentiviral ของปัจจัยสี่ประการ Sommer et al. (เซลล์ต้นกำเนิด 27(3):543–549, 2009), การส่งไวรัสเซนได Fusaki et al. (การดำเนินการของ Japan Academy. Series B, Physical and Biological Sciences 85(8):348–362, 2009), การลบเวกเตอร์ reprogramming โดย 'piggyBac' transposition Woltjen et al. (ธรรมชาติ 458(7239):766–770, 2009) Kaji และคณะ (ธรรมชาติ 458(7239):771–775, 2009), Cre-recombinase ไวรัส excisable ไวรัส Soldner et al. (เซลล์ 136(5):964–977, 2009), episomal vectors Yu et al. (วิทยาศาสตร์ 324(5928):797–801, 2009), โปรตีน reprogramming เจาะเซลล์ Zhou et al. (เซลล์ต้นกำเนิด 4(5):381–384, 2009), โครโมโซมเทียมของสัตว์เลี้ยงลูกด้วยนม Hiratsuka et al. (PLoS One 6(10):e25961, 2011) mRNAs ดัดแปลงสังเคราะห์ Warren et al. (รายงานทางวิทยาศาสตร์ 2:657, 2012), miRNA Anokye-Danso และคณะ (Cell Stem Cell 8(4):376–388, 2009) อย่างไรก็ตาม แม้ว่าวิธีการเหล่านี้บางวิธีมีจำหน่ายในท้องตลาด โดยทั่วไปแล้ว วิธีการเหล่านี้ยังคงต้องการความสามารถในการทำซ้ำและประสิทธิภาพการตั้งโปรแกรมใหม่ที่จำเป็นสำหรับการใช้งานประจำ Mochiduki และ Okita (Biotechnol Journal 7( 6):789–797, 2555). ในที่นี้ เราอธิบายในโปรโตคอลแบบละเอียดสี่แบบ การแยกเซลล์โซมาติกของเมาส์และเซลล์ร่างกายของมนุษย์ และการตั้งโปรแกรมใหม่ของพวกมันใน iPSC คำแนะนำที่ครอบคลุมทั้งหมด ซึ่งไม่ได้เผยแพร่ก่อนหน้านี้ในเอกสารเดียว มีให้สำหรับการแยกและการสืบทอดอาณานิคมของเมาส์และ iPSC ของมนุษย์ แม้ว่าเมาส์และ iPSC ของมนุษย์จะมีความคล้ายคลึงกันในกระบวนการและวัฒนธรรมการตั้งโปรแกรมใหม่ของเซลลูลาร์ แต่เซลล์ทั้งสองประเภทจำเป็นต้องได้รับการจัดการต่างกัน

นี่คือตัวอย่างเนื้อหาการสมัครสมาชิก เข้าถึงผ่านสถาบันของคุณ